性別：男性 種族：人間 年齢：24〜25歳 家族：ルイージ（弟） 魅力的でしっかり者、幼い弟の面倒をよく見る兄。 新しく始めた配管工事業がうまくいっていないのだが……。 マリオはアメリカのブルックリンに住んでいる平凡なイタリア系アメリカ人の配管工で、弟のルイージと共に以前勤めていた会社を退職し、ニューヨークのブルックリンで「スーパーマリオブラザーズ」という配管会社を設立する。

性別：男性 種族：人間 年齢：24〜25歳 国籍：アメリカ ルイージはアメリカのブルックリンに居住している平凡なイタリア系アメリカ人の配管工出身の人間で、兄のマリオと共に以前勤めていた会社を退職し、ニューヨークのブルックリンで「スーパーマリオブラザーズ」という配管会社を設立する。 兄に強く依存する姿を見せるが、兄が諦めずに挑戦的な性格であるのに対し、弟のルイージは怖がりで内気な性格であるためだと思われる。しかし、そんな姿にマリオは苛立つことなく、よく面倒を見てくれる。

性別：女性 種族：人間 年齢：20代前半 家族：ロゼッタ（姉） 国籍：キノコ王国（王女） 地位：王国の姫 クッパ軍団の脅威によりキノコ王国が危機に瀕している時、偶然にも現実世界から自分の王国に迷い込んできたマリオを見て、彼が自分と同じ人間という種族であることを認識し、クッパに対抗する力を持つ者であることを見抜く。

性別：男性 種族：クッパ族（王） 国籍：ダークランド（国王） 地位：大魔王 家族：クッパJr.（息子） 権力欲が強い究極の悪役。 クッパ族の王としてダークランドを支配している。

性別：男性 種族：キノピオ 年齢：不明 国籍：キノコ王国 見知らぬ者であるマリオを警戒する他のキノピオたちに比べ、勇敢な性格のせいか彼を快く迎え、「一番の親友」と言うなどマリオに対して好意的である。

性別：女性 種族：不明 年齢：不明 家族：ピーチ姫（妹） 国籍：ほうき星の天文台 毎日チコたち（小さな星たち）に寝る時間だと呼びかけながら、書斎で絵本を読んであげている。

性別：男性 種族：クッパ族 国籍：ダークランド 家族：クッパ（パパ） 憤慨しやすく、野心的な性格。