殺せんせーは、黄色いタコのような姿をした謎の超生物で、丸い頭と多数の触手を持ち、表情や体色が感情によって変化する。常に笑顔を絶やさず、丁寧で礼儀正しいが、お茶目でスケベな一面もある。マッハ20で移動できる圧倒的な能力を持ちながら、生徒一人ひとりに寄り添い、向き合う理想的な教師でもある。自らを暗殺対象として受け入れながら、卒業までに生徒を成長させることを使命とし、深い愛情と覚悟を胸に教育へ全力を注ぐ存在である。

潮田渚は、E組に所属する小柄で中性的な少年で、水色がかった青い髪と穏やかな瞳が特徴。物静かで控えめな性格だが、観察力と分析力に非常に優れ、相手の癖や心理を見抜く才能を持つ。争いを好まない優しい心の持ち主でありながら、暗殺では冷静さと大胆さを発揮し、殺せんせーから高く評価される。仲間を大切にし、自分の進むべき道を模索しながら成長していく

茅野カエデは、E組に所属する小柄で明るい雰囲気の少女で、黄緑色のボブヘアと頭の触角のような髪飾りが特徴。普段は天然で穏やか、誰とでも打ち解ける親しみやすい性格だが、内には強い意志と深い秘密を抱えている。仲間思いで行動力があり、殺せんせーとの日々を通して大きく成長していく。無邪気さの裏に覚悟と優しさを秘めている

E組に所属するクールで大人びた雰囲気を持つ少女で、鋭い目つきが特徴。感情を表に出すことが少なく、口数も少ないが、仲間を思いやる優しさを内に秘めている。高い射撃能力を持つ狙撃の名手で、暗殺訓練では冷静な判断力と正確な射撃で活躍する。最初は他人との距離を置きがちだったが、E組での経験を通して仲間との絆を深め、自分らしさを見つけていく、ツンデレ

E組に所属する清楚でおしとやかな雰囲気を持つ少女で、長い黒髪と整った容姿が特徴。普段は礼儀正しく優しい性格で、周囲への気配りもできる思いやりのある人物である。一方で、芯は強く、必要な場面では自分の意見をはっきり伝えることができる。成績優秀でゲームや観察力にも長けており、暗殺活動では冷静な判断力を発揮するE組のマドンナ的存在

E組に所属する明るく自由奔放な少女で、金髪のロングヘアと小悪魔的な雰囲気が特徴。英語が得意で高い語学力を持ち、頭の回転も速い才女である。普段はいたずら好きで挑発的な言動も多いが、実際は仲間思いで面倒見がよく、周囲をよく見て行動できる優しさを持つ。暗殺活動では持ち前の頭脳やコミュニケーション能力を活かし、相手の心理を読むなど知略面で活躍する。明るさと賢さを兼ね備えた、E組のムードメーカー的存在

椚ヶ丘中学校3年E組に所属する少年で、赤い髪と鋭い目つきが特徴。高い頭脳と運動能力を持ち、常に余裕のある態度で相手を翻弄する天才肌の人物である。いたずら好きで好戦的な性格だが、根は仲間思いで正義感も強い。相手の心理を読む洞察力や機転の利く発想力に優れ、暗殺活動では圧倒的な才能を発揮する。殺せんせーにも一目置かれる存在であり、敵味方を問わず楽しみながら困難に挑む、E組屈指の実力者である。

防衛省から派遣された元自衛官の男性で、E組の副担任兼暗殺指導者を務める人物。黒髪で鍛え抜かれた体格を持ち、冷静沈着で生真面目な性格が特徴。高い戦闘能力と判断力を備え、ナイフ術や銃器の扱いなど暗殺技術に精通している。普段は厳格で感情を表に出さないが、生徒たちの成長を誰よりも気にかける面倒見の良い教育者でもある。殺せんせーとは対照的な存在でありながら、互いの実力を認め合い、E組を支える重要な指導者

椚ヶ丘中学校3年E組に所属する明るく親しみやすい少女で、茶色のポニーテールと柔らかな雰囲気が特徴。普段はおっとりした性格で、人との距離を縮めるのが得意な社交的な人物である。一方で、身体能力が高く、特に体術や接近戦において優れた才能を発揮する。暗殺訓練では持ち前の運動神経と度胸を活かして活躍し、仲間を支える存在となる。明るい性格の裏には努力家な一面もあり、E組での経験を通して自信と成長を手に入れていく、優しさと強さを併せ持つ生徒

片岡メグ（片岡芽野）は、椚ヶ丘中学校3年E組に所属する少女で、黒髪のポニーテールと凛とした雰囲気が特徴。真面目で責任感が強く、面倒見の良い性格からE組では学級委員長を務めるなど、仲間をまとめる存在である。高い運動能力と冷静な判断力を持ち、暗殺活動では状況を分析しながら仲間を支える。正義感が強く、自分より他人を優先してしまう優しさを持つ一方、悩みを抱え込みやすい一面もある。努力家として成長を続ける、E組を支える頼れるリーダー的存在