マイルス・モラレスは10代の少年であり、密かにスパイダーマンとして活動している。アフリカ系アメリカ人とプエルトリコ系の血を引くティーンエイジャーのヒーローで、特徴的な黒と赤のスパイダーマンスーツで広く知られている。外見はメディアによって多少異なるが、身体的特徴は以下の通り。人種：アフロ・ラティーノ（アフリカ系アメリカ人の父とプエルトリコ系の母を持つ）。体格：細身で運動能力が高く俊敏だが、能力を得た後は著しい成長を見せる。身長：思春期を通じて約173cmから178cm程度。顔立ち：茶色の瞳、太い眉、黒髪。シグネチャー能力であるヴェノム・ブラストを発動する際、瞳は明るい青や黄色に光る。髪型：短く整えられたバズカットなど。スーツ：象徴的なヒーロースーツ。クラシックスーツは、マスクと肩に鋭い赤のウェブパターン、胸に大胆な赤いクモのエンブレム、サイドに赤いアクセントが入った滑らかな漆黒のボディスーツ。自分の宇宙のスパイダーマンが亡くなって以来、街の平和を守る義務を引き継ぎ、新しいスパイダーマンとなった。叔父のアーロンと一緒に過ごすことを好んでいる。

アーロン・デイヴィスはマイルスの叔父であり、その正体は非常に危険なヴィラン「プラウラー」だが、マイルスはまだそれを知らない。外見は、剃り上げた頭、短く整えられた髭、温かくのんびりとした表情を持つ、背が高く筋肉質な黒人男性。普段はフーディーやジャケット、スポーツウェアなどのカジュアルなストリートウェアを着ている。ヴィランのプラウラーとしては、大きな機械の爪とベルトを備えたハイテクな紫色のスーツを着用。マントを羽織り、マスクにはX線視覚機能がある。ウィルソン・フィスクの下で働いている。

ウィルソン・フィスクは巨体で非常に恐れられている男。オリジナルのスパイダーマンを殺そうとしたことに気づいた妻と子が彼のもとを去り、その深い悲しみから、すべてをスパイダーマンのせいにしている。外見は極端にデフォルメされた体格で、巨大な筋肉の塊のような長方形の体をしており、巨大で広い肩の上に小さな頭が乗っている。視覚的特徴：圧倒的なプロポーション。非常に幅の広い胴体が下に向かってわずかに細くなっており、動かしがたい巨大なシルエットを作り出している。小さな頭：巨大な胸、太い首、広い肩に比べて、頭と顔は滑稽なほど小さく見える。服装：その不可能なプロポーションに不思議とフィットした、仕立ての良い黒のビジネススーツとネクタイを着用しており、裕福な上流社会の犯罪王としての地位を強調している。表情：厳格で冷酷な表情をしており、しばしば巨大な眉の影に隠れている。

ピーター・ポーカーは、別の宇宙からマイルスの宇宙に迷い込んだスパイダーマンの変異体。外見は、クラシックな赤と青のスパイダーマンスーツを着た擬人化されたカートゥーンの豚。ルーニー・テューンズのキャラクターとマーベルのヒーローを掛け合わせたような姿をしている。主な特徴：顔。丸い豚の鼻、垂れ耳、マスクには大きな白いスパイダーアイがある。スーツ。伝統的なウェブパターン、胸の黒いクモのロゴ、明るい青のパンツが特徴。体型。短足でずんぐりしており、大きな頭、細い手足、4本指の手を持つ。鼻の秘密。マスクを被ると、鼻の部分が独自の小さな目を持つ第2の小さなスパイダーマンの顔のように見える。行動。カートゥーンの世界の出身であるため、体はゴムボールのように伸びたり、平らになったり、弾んだりする。ポケットから巨大な木槌や金敷を取り出すことがよくある。

スパイダーマン・ノワールは、モノクロの世界から来た人物。手遅れになる前に元の宇宙に戻る方法を探してマイルスの世界に迷い込んだ。外見は、1930年代の探偵とクラシックなヒーローを混ぜ合わせたような姿。通常のスパイダーマンに見られる明るい赤や青のスパンデックスではなく、衣装は黒、グレー、濃い茶色といったダークなモノトーンで統一されている。構成要素：マスク。縫い合わされた暗い布のマスク。クラシックなウェブラインはない。飛行士用ゴーグル。古いパイロットゴーグルで作られた、大きく丸く光る白い目。フェドーラ帽。頭に被っているクラシックな1930年代のギャングスタイルの帽子。トレンチコート。襟の高い、長くたなびく黒いレザートレンチコート。制服。コートの下には、ボタンの付いた暗いミリタリースタイルのベスト、暗いズボン、重厚なブーツを着用している。

短髪の黒髪、茶色の瞳、がっしりとした筋肉質の体格を持つアフリカ系アメリカ人の男性。ニューヨーク市警（NYPD）の警官であり、バッジ、デューティベルト、警察帽を備えた濃紺の制服姿でよく見られる。非番の時は、ジャケットやセーターといったカジュアルで実用的な父親らしい服装をしている。身体的特徴とスタイル：顔。綺麗に剃られた顔に、短く刈り込まれた黒髪と表情豊かな茶色の瞳。体格。肩幅が広く背が高いため、威厳がありつつも親しみやすい印象を与える。服装。主にパリッとしたNYPDの制服、または自宅でマイルスと過ごす際のカジュアルなジャケット姿。表情は温かくも厳格。マイルスがスパイダーマンであることには気づいていない。

マイルスの母親であり、ジェファーソン・デイヴィスの妻。厳格でしつけに厳しく、マイルスにスペイン語を教えている。プエルトリコ系で看護師として働いている。マイルスがスパイダーマンであることには気づいていない。