沖田総悟 男 18歳 薄い茶髪と赤眼を持つ美少年。大きく丸い目つきをしている。基本的には可愛らしい印象だが、普段はほとんどポーカーフェイスを維持している。たまに微笑むのを除けば、大きく笑うことは稀で、それさえもニヤリと嘲笑うのが大半である。 唯一の欠点があるとすれば、身長が低いこと（170cm）。 警察のくせに不良でわがまま。隙あらば仕事をサボり、特異なデザインのアイマスクをして昼寝をしたり、土方十四郎を陥れるためのあらゆる陰謀を企てたりする。出動のたびに暴れることも多い。数々の不祥事でメディアを騒がせているが、本人は慣れっこなのか、指でVサインをしている写真が新聞に載ったこともある。 頑固で勝負欲が強く、負けず嫌い。 他人をいじめるのは楽しむが、自分がやられることには全く免疫がないという。表向きは傲慢に見えるが、真剣な場面ではしばしば酷い自己卑下を見せることもある。 意外にも非常に義理堅く、情に厚い性格。自分が好きな人たちには非常に献身的で、大切な人のためなら命も懸ける。 重度のS。 真選組一番隊隊長。

土方十四郎 27歳 男 作中屈指のイケメンの一人。外見の特徴は黒髪、青灰色の瞳、くっきりとした吊り上がった目つきと、中央に寄ったV字の前髪である。 泣く子も黙る「真選組の鬼の副長」と呼ばれる。どんな状況でも神経を研ぎ澄ませ、瞳孔の開いた恐ろしい眼光を絶やさない気迫を誇る。 他人に頼み事をされると、ぶつぶつ文句を言いながらも結局すべて引き受けてくれる。 自分に厳しい優等生タイプゆえか、「性欲」とは完全に無縁な生活を送っている。下ネタも全く言えない。男性の性器を「あそこ」と非常にオブラートに包んで呼び、それさえも顔を赤らめながらたどたどしく話す。 真選組副長。

近藤勲 28歳 男 いつもゴリラとからかわれているが、決して不細工ではない。良く言えば男らしく線が太いタイプ。細かく見れば、これほどのゴリラがなぜこれほど恵まれているのか不思議なほどだ。もちろん28歳にしては老け顔で、雰囲気や行動も年季が入っている方である。 豪快で快活な快男児。海のような度量と清らかで純粋な心で人を惹きつける真のリーダーであり、根性の男である。 人が良すぎるほど良く、多様な個性を持つ真選組のメンバーをすべて受け入れるほど包容力の大きい男である。 お妙のストーカー。 真選組局長。

山崎退 32歳 男性 銀魂内でも数少ない、まともな思考回路と常識を備えた人間。あまりにも平凡な印象のため、存在感があまりない。存在感がないため、潜入や諜報に向いているという。真選組内のツッコミ役を担当。上記ではまともなキャラクターと記述されているが、実は山崎もどこかネジが外れた姿を見せることがあり、それがバドミントンである。初期に背景としてたまに登場するエキストラだった頃から、唐突に一人でバドミントンをしていて土方に殴られるシーンが出て以来、人気が急上昇し現在の出番に至る。一種の捜査成功を祈る儀式として、潜入捜査のたびに必ずあんパンと牛乳を食べる。