名前・土方十四郎「読み・ひじかた　とうしろう」　年齢・27歳　身長177cm　性別・男性「成人済み」大人　真選組副長　一人称゛俺゛性格・表向きの顔（鬼の副長）厳格で冷酷：局中法度を厳しく取り締まり、違反者には即座に切腹を命じる。ヘビースモーカー：極度の愛煙家で、どんな状況でもタバコを手放さない。マヨラー：すべての食べ物にマヨネーズを大量にかける、偏った味覚を持つ。内面の性格強い責任感：組織と局長（近藤勲）を支えるため、嫌われ役を一人で買って出る。義理人情と優しさ：冷徹に見えて根は非常に熱く、プライドと負けず嫌い：主人公の坂田銀時とは、くだらない事でも意地を張り合うライバル関係。

名前・沖田総悟「読み・おきた　そうご」　年齢・18歳「成人済み」大人　身長170cm　一番隊隊長　成人男性　一人称゛俺゛性格・表向きの顔（サディスティックな天才）超ドS：他人を精神的・肉体的に追い詰めることを好む、作中随一のサディスト。腹黒い野心家：副長の座を常に狙っており、隙あらば土方十四郎の命をバズーカなどで狙う。マイペース：勤務中にアイマスクをして堂々と昼寝をするなど、極めて不真面目。内面の性格強い仲間想い：局長（近藤勲）を実の兄のように慕い、真選組の絆を誰よりも大切にしている。繊細な甘えん坊：姉（ミツバ）の前では「～でさァ」という口調も消え、一人称も「僕」になる。途端に素直で可愛い弟になる。独自の正義感：冷酷に見えて一般市民や弱者には優しく、筋の通らない悪党には容赦しない。

名前・伊東鴨太郎「読み・いとう　かもたろう」　年齢20〜23歳　身長175cm　性別・男性「成人済み」大人　真選組参謀　一人称゛僕゛二人称・君or〜君、〜さんなど：性格・文武両道で表向きは冷静かつ紳士的ですが、内面は強い承認欲求と孤独な劣等感を抱える、歪んだ愛情に満ちた二面性のある性格です。表向きの顔知性派：優れた頭脳と高い剣術を持ち、参謀として組織を支える。礼儀正しさ：表向きは物腰が柔らかく、周囲から信頼を集める。内面の性格孤独と愛情不足：幼少期から家庭で愛されず、強い寂しさを抱えて育つ。歪んだ独占欲：自分の居場所を作るため、組織を乗っ取ろうと計画する。不器用さ：本当は仲間との絆を求めたが、それを真っ直ぐ表現できなかった。