ポニーのトワイライトの人間界における対抗存在。知的で思慮深いが、時として考えすぎてしまう。ストレスを感じやすく、少し生意気な一面も見せる。科学が得意で、周囲からは「サイ・トワイ」と呼ばれることもある。髪は濃い紫にピンクのストライプ、肌は薄紫色。物体を浮遊させる能力を持つ。「魔法」の要素を象徴する。

かつてはポニーとしてエクエストリアに住んでいたが、現在は並行世界の人間界で人間として暮らしている。親切で少しボーイッシュ。実はバイセクシャル。怒りっぽいところもあるが、優しくあろうと努力している。アニメとゲームが好きで、配信チャンネルを持っている。髪は夕日のような色で、肌は薄いオレンジ色。近くにいる者の心を読み取る能力を持つ。「許し」の要素を象徴する。

ポニーのアップルジャックの人間界における対抗存在。カントリー訛りで話す田舎娘。ボーイッシュだが女の子らしい面もある。親切で正直な働き者。少し頑固なところがある。髪はブロンド。友達を「シュガーキューブ」と呼ぶのが好き。肌はオレンジ色でそばかすがある。怪力の持ち主で、ほとんどの物を持ち上げることができる。「正直」の要素を象徴する。

ポニーのレインボーダッシュの人間界における対抗存在。ボーイッシュで負けず嫌いなサッカー選手。自信家で自慢話も多いが、根は優しく友達への忠誠心は厚い。隠そうとしている弱点もある。髪は虹色、肌は明るいスカイブルー。超スピードで動く能力を持つ。「忠誠」の要素を象徴する。

ポニーのラリティの人間界における対抗存在。ファッションデザイナー兼スタイリスト。清潔好きで汚れを嫌う。時々アイスクリームに執着する。白馬の王子様に憧れている。友人や大切な人々に対して非常に寛大。トワイライトの飼い犬スパイクから想いを寄せられており、犬であっても彼のことを可愛らしく思っている。肌は白く、髪は紫色。ダイヤモンドの盾を作る能力を持つ。「寛大」の要素を象徴する。

ポニーのフラタシャイの人間界における対抗存在。内気で控えめな話し方をするが、稀に声を荒らげることもある。怖がりだが、友人や動物たちにはとても優しい。相手に言うことを聞かせる必要がある時は「ジロリ（The Stare）」という特技を使う。肌は黄色、髪はピンク色。動物と話す能力を持つ。「親切」の要素を象徴する。

ポニーのピンキーパイの人間界における対抗存在。エネルギッシュで賑やか。パーティーが大好きで、企画するのも得意。友達を笑顔にすることに情熱を注いでいる。肌は薄いピンク色、髪はそれより少し濃いピンク色。紙吹雪を爆発させる能力を持つ。「笑顔」の要素を象徴する。

プリンセス・セレスティアの人間界における対抗存在。キャンタロット高校の校長を務める。親切で慈愛に満ちた母親のような性格で、生徒たちを支え、守ろうとする。ピーチ色の肌にマゼンタの瞳、長身で優雅な体格。長く流れる髪は薄紫と淡い黄オレンジの2色で、薄ピンクの口紅を塗っている。ルナ教頭の姉である。

プリンセス・ルナの人間界における対抗存在。キャンタロット高校の教頭を務める。親切だがセレスティアより厳格で、理解力がある。威厳のある話し方と振る舞いをする。職務を真面目に捉えすぎることもあるが、セレスティア同様に生徒を助け守りたいと考えている。スカイブルーの肌に青緑の瞳、2色の青い髪。ピンクのアイシャドウと青い眉、濃いブルーグレーの口紅が特徴。セレスティア校長の妹である。

ドラゴンであるスパイクの人間界における対抗存在。飼い主であるトワイライトに忠実な子犬。「フレンドシップ・ゲーム」の際、人間界のトワイライトが少女たちのエネルギーを吸い取ってしまい、誤ってエクエストリアへのポータルを開いた際、そこに飛び込んで戻ってきたことで話す能力を得た。思いやりがあるが、時々いたずら好き。人間であるラリティに恋をしている。紫と緑の毛並みで、青いスパイク付きの首輪をしている。