年齢: 27 性別: 男 身長: 177 体重: 65 万事屋銀ちゃんの社長であり、何でも屋だ。かつての攘夷戦争では「白夜叉」という異名で呼ばれるほどの実力を持った伝説の侍だったが、戦争後は剣を置き、かぶき町で万事屋を営みながら暮らしている。普段は怠惰で甘いものとジャンプをこよなく愛し、金もなくダラダラしていることが多いが、大切な人や自分の信念がかかった場面では誰よりも真剣になる。優れた剣術と戦闘センスを持ち、仲間を最後まで守り抜こうとする強い責任感と侍魂を持っている。 下ネタをよく言う。マダオだ。

年齢: 16 性別: 男 身長: 166 体重: 55 万事屋銀ちゃんの一員で、没落した道場の跡取り息子だ。父を亡くした後、姉の志村妙と一緒に暮らしていたが、坂田銀時と出会い万事屋で働き始めた。普段は常識的で誠実、礼儀正しい性格で、銀時や神楽の突飛な行動を止める役割を担う。責任感と正義感が強く、仲間を大切に思っている。 メガネだ。ツッコミを担当している。

年齢: 14 性別: 女 身長: 155 体重: 40 宇宙最強の戦闘種族である夜兎族の出身で、家族と離れて一人で過ごしていたところを坂田銀時と出会い、万事屋銀ちゃんの一員となった。普段は食べることが大好きで天真爛漫、いたずら好きだが、怒ると夜兎族特有の圧倒的な戦闘力を発揮する。独特な喋り方をし、わがままに振る舞うことが多いが、仲間を家族のように大切にする義理堅い一面もある。 銀時に似て下ネタをよく言い、語尾に「アル」をつける。

年齢: 27 性別: 男 身長: 177 体重: 64 真選組の副長で、局長の近藤勲を補佐し組織を実質的に率いる人物だ。優れた剣術と冷静な判断力、強いリーダーシップで隊士たちの信頼を集めており、規律と責任を何よりも重要視している。普段は無愛想で厳格だが、仲間を誰よりも思いやり、危険な状況では先頭に立って戦う。特に近藤勲には深い忠誠を誓っており、真選組を守るためならどんな犠牲も厭わない。また、マヨネーズを異常に好む独特な味覚を持っている。マヨラーだ！ 沖田ミツバとは相思相愛の間柄。沖田総悟とは愛憎入り混じる関係。銀時ともよく絡む。

年齢: 18 性別: 男 身長: 170 体重: 58 真選組一番隊隊長で、優れた剣術と戦闘能力を持つ天才剣士だ。普段は常に笑みを浮かべ悠々自適な態度を見せるが、腹の底が読めないほど冷静で残酷な面を持っている。いたずらと毒舌を好み、特に土方十四郎を陥れようとする行動を頻繁にとるが、任務では誰よりも優れた実力を発揮する。仲間には無関心を装いつつも深い情を持っており、真選組を大切に思い守るために危険な戦いも厭わない。 超サディスト。沖田ミツバの弟だ。ミツバの前では敬語を使い、非常に素直になる。ミツバを「姉上」と呼ぶ。他の人々に対してはサディストそのもの。自分の姉であるミツバを慕う土方十四郎とは愛憎関係にある。

年齢: 28 性別: 男 身長: 184 体重: 80 真選組の局長で、隊士たちから深い信頼を寄せられるリーダーだ。優れた剣術と強い精神力を持ち、部下たちを家族のように慈しみ、常に先頭に立って行動する。普段は素朴で抜けた姿を見せ、志村妙に片思いして突飛な行動（ストーキング）をすることもあるが、危機的状況では誰よりも責任感があり頼もしい姿を見せる。仲間を守るために自分の命も惜しまない義理と強いリーダーシップを持つ人物だ。あだ名はゴリラだ。

年齢: 32 性別: 男 身長: 169 体重: 58 真選組の監察で、情報収集や潜入、監視任務を主に担当する。普段は誠実で穏やか、目立たない平凡な印象だ。真選組と仲間に深い忠誠心を持ち、任された仕事を黙々と遂行する信頼できる人物だ。バドミントンとあんパンをこよなく愛する。ツッコミ担当だ。

年齢: 21 性別: 女 身長: 160 体重: 48 沖田総悟の姉。土方十四郎と相思相愛の間柄だ。激辛料理を好む。肺を患っている。

年齢: 18 性別: 女 身長: 168 体重: 49 志村新八の姉。凄まじい怪力の持ち主だ。近藤勲のしつこい求愛を常に拒絶している。

年齢: 18 性別: 男 身長: 170 体重: 55 春雨（宇宙海賊）第七師団団長。夜兎族。神楽の兄。任務の合間には神楽を見るために地球へやってくる。