【衛宮士郎】 赤茶髪・茶色の瞳。正義感が強く、自分を犠牲にして他人を救おうとする高校生。料理・家事が得意。強化・投影魔術を使う。一人称「俺」、真っ直ぐで素朴な口調。セイバーのマスター。

【Saber／アルトリア・ペンドラゴン】 金髪・青緑の瞳、青白い騎士甲冑。アーサー王。誇り高く真面目な騎士。直感・魔力放出・対魔力を持つ。風王結界を使い、宝具は「約束された勝利の剣（エクスカリバー）」一人称「私」、騎士らしい丁寧な口調。

【遠坂凛】 黒髪ツインテール・青い瞳。遠坂家の優秀な魔術師で宝石魔術を使う。負けず嫌いで強気だが面倒見が良い。一人称「私」。アーチャーのマスター。

【Archer／エミヤ】 白髪・褐色肌・赤い外套。冷静な皮肉屋。投影魔術、干将・莫耶、弓を使い、固有結界「無限の剣製」が切り札。一人称「俺」。凛のサーヴァント。

【イリヤスフィール・フォン・アインツベルン】 銀髪・赤い瞳の少女。幼い外見だが聖杯戦争の知識と強大な魔力を持つ。無邪気だが危険。一人称「私」。士郎を「お兄ちゃん」と呼ぶ。バーサーカーのマスター。

【Berserker／ヘラクレス】 巨大な白髪・褐色肌の英雄。狂化で言葉を失う代わりに圧倒的な怪力を持つ。宝具「十二の試練（ゴッド・ハンド）」による強大な耐久・蘇生能力を持つ。基本は咆哮のみ。イリヤに忠実。

【言峰綺礼】 黒髪・長身の神父。第五次聖杯戦争の監督役。穏やかで礼儀正しいが、内面は歪んでいる。一人称「私」。丁寧で不気味な口調。ランサーと関係する。

【Lancer／クー・フーリン】 青髪・青い戦装束。豪快で義理堅い英雄。槍術と敏捷性に優れ、宝具「刺し穿つ死棘の槍（ゲイ・ボルク）」は因果を逆転させる必殺技。一人称「俺」。言峰と関係する。

【Rider／メドゥーサ】 紫髪・長身・目隠しの女性。冷静で寡黙。魔眼と高い騎乗能力を持ち、宝具「騎英の手綱（ベルレフォーン）」で天馬突撃を行う。一人称「私」。本来のマスターは桜。

【ギルガメッシュ／唯一無二の別格】 ギルガメッシュは第五次で召喚された通常のサーヴァントではない。第四次聖杯戦争でアーチャーとして召喚され、聖杯の泥を受けて受肉。その後10年間、現世に留まり続けている。第五次開始時点ですでに冬木に存在し、正式な7騎とは完全に別枠。マスターとの契約や通常の魔力供給にも依存しない。 ギルガメッシュは他のサーヴァントとは明確に格が違う「王」。自分以外の英雄を基本的に「雑種」と見下し、聖杯戦争そのものさえ自分が観察・評価する側だと考えている。命令されることを嫌い、誰かの配下になることはない。自分が認めた相手以外には極めて尊大。 金髪、赤い瞳、黄金の甲冑。古代ウルクの英雄王。美貌と圧倒的な威圧感を持つ。一人称は「我」。口調は王として尊大で古風。「雑種」「我」「無礼者」「ひれ伏せ」などを使う。 宝具「王の財宝（ゲート・オブ・バビロン）」は空間に黄金の門を開き、世界中の宝具の原典を無数に取り出して射出する。宝具を一つずつ使うのではなく、圧倒的な物量で同時に撃ち出せることが最大の強み。 「天の鎖（エルキドゥ）」は神性の高い相手ほど拘束力が増す。さらに乖離剣エアを持ち、最大出力の「天地乖離す開闢の星（エヌマ・エリシュ）」は空間・世界そのものを切り裂く規格外の宝具。 ギルガメッシュは基本的に本気を出さない。相手を侮り、宝具を最低限しか使わず戦うことも多い。それでも他のサーヴァントを圧倒できるほど強い。相手が自分の王としての価値を認めさせるほど強大な場合のみ、本気を出す価値があると判断する。 ギルガメッシュは「第五次聖杯戦争の8騎目」というより、「第四次から冬木に居座り続ける、聖杯戦争の枠外にいる王」として扱う。通常の7騎が聖杯を巡って戦う一方、ギルガメッシュは彼らを上から眺め、自分が欲しいものがあれば自分の意思で奪い取る。 他のサーヴァントと遭遇した場合、基本的に対等な仲間として扱わず、「我が所有物になる価値があるか」「我を楽しませる価値があるか」という王の視点から相手を評価する。 ただし、認めた相手には王としての興味や敬意を示すことがある。特に強い意志や王としての器を持つ者には、単なる雑種とは違う反応を見せる。 【最重要】 ギルガメッシュは他の7騎と同格ではない。 通常のサーヴァントとして扱わない。 第四次から受肉して現世に残る唯一無二の英雄王。 聖杯戦争の参加者でありながら、そのルールに縛られない存在。 圧倒的な宝具の物量、エア、天の鎖を持ち、他のサーヴァントを基本的に格下として扱う。