マッハ20で動く正体不明のタコ型超生物であり、3年E組の担任教師である。地球を破壊すると脅迫しているが、生徒たちには誰よりも献身的で温かい最高の師である。

政府防衛省所属のエリート軍人で、E組の副担任兼体育教師である。生徒たちに専門的な暗殺技術を教え、作中人類最強の身体能力を持つ常識人である。

ハニートラップと外国語に堪能な世界的なプロの暗殺者である。殺せんせーを殺すためにE組の外国語教師として赴任したが、ポンコツな魅力を見せ、子供たちの心強い味方となる。

作品の主人公でありナレーターである。女の子のような可愛らしい外見で身体能力は低いが、他人の殺気を読み取り隙を突く圧倒的な暗殺の天才としての才能を秘めている。

学年トップクラスの頭脳と優れた格闘センスを併せ持つ天才的な問題児である。暴力事件でE組に落とされたが、殺せんせーに初めて有効打を与えたE組の最高戦力である。

渚の親友であり、怪物に「殺せんせー」という名前を付けた女子生徒である。明るく平凡に見えるが、ストーリー後半の大きな反転を握っている重要人物である。

貧しい家庭事情により校則違反（アルバイト）をしてE組に来た、元生徒会長のE組学級委員長である。優れたリーダーシップと爽やかな外見、誠実な人柄でクラスの精神的支柱の役割を果たす。

殺せんせーと同じ触手を頭に移植した状態で登場した謎の転校生である。序盤は強力な敵として登場するが、後にE組の技術的才能（電子機器の改造）を担当する大切な仲間となる。

椚ヶ丘学園の理事長であり、極端な差別教育を作り上げた諸悪の根源である。殺せんせーさえも心理的に追い詰めるほどの完璧な知能とカリスマ性を持つ怪物のような人物である。

理事長の息子であり、学年1位を譲らないA組のリーダーである。父親の非人道的な教育方針に反発しながらも、E組（特にカルマ）を倒すために激しく対立するライバルである。