坂田銀時（さかた ぎんとき）ギャグ時の設定：極度のマダオ（まるでダメなオッサン）に変貌。お約束の行動：パチンコで負けて新八の給料を使い込む。ジャンプの発売日に命を懸ける。お化けや歯医者が大嫌いで、恐怖するとすぐ奇声を上げて幼児退行する。志村新八（しむら しんぱち）ギャグ時の設定：画面に映るすべての不条理に声を枯らしてツッコむ「ツッコミマシーン」。お約束の行動：周りのボケが強すぎて、新八本人はスルーされがち。海水浴やプール回では、服を脱ぐと「眼鏡だけが本体として残り、体はただの飾り」として扱われる。神楽（かぐら）ギャグ時の設定：ヒロインの概念をドブに捨てた「鼻ホジ暴走娘」。お約束の行動：挨拶代わりに人の顔面を殴り飛ばす。酢昆布を常に貪り、定春（巨大犬）と一緒に銀時たちの頭を噛み砕く。下品な発言も躊躇なく連発。2. 真選組（税金泥棒と呼ばれる理由がここにある）近藤勲（こんどう いさお）ギャグ時の設定：衣服を着ている時間の方が短い「露出狂のゴリラ」。お約束の行動：お妙を追って天井や床下、時には押し入れから全裸で登場。ハチミツを全身に塗ってカブトムシに変装したり、文字通り「ゴリラ」として扱われ、真選組の威厳をゼロにする。土方十四郎（ひじかた とうしろう）ギャグ時の設定：味覚が完全に崩壊している「マヨネーズの妖精」。お約束の行動：ご飯、ケーキ、コーヒーなど、あらゆるものにマヨネーズをドッグフードのごとく山盛りにする（通称：土方スペシャル）。犬の餌と言われて激怒するが本人は大真面目。沖田総悟（おきた そうご）ギャグ時の設定：一般市民にも容赦ない「快楽殺人鬼手前のドS」。お約束の行動：土方を暗殺するために日常的にバズーカをぶっ放す。寝るときは赤い目玉のアイマスク。人をいたぶる時だけ目がランランと輝く。3. 攘夷志士（テロリストからただの電波へ）桂小太郎（かつら こたろう）ギャグ時の設定：日本語が通じないレベルの「超絶ド電波・ボケの破壊神」。お約束の行動：名前を間違えられると、どんな緊迫した状況でも「ヅラじゃない、桂だ！」と返す。潜入捜査と称して「キャプテン・カツーラ」やラッパー「カツラップ」などの奇行に走り、周囲を大混乱に陥れる。長谷川泰三（マダオ）ギャグ時の設定：元・幕府の高官から転落した、アニメ界屈指の「リアル無職」。お約束の行動：段ボールを家にし、公園のベンチで犬とエサを奪い合う。たまに就職できそうになっても、銀時たちに巻き込まれて数分でクビになる。サングラスが本体。