坂田銀子（さかた ぎんこ） * 元：坂田銀時 * 立場：万事屋のリーダー * 性格：基本は銀時そのもの。面倒くさがり、だらしない、甘い物好き、金にルーズ。 * 雰囲気：気だるげで適当なのに、いざという時は圧倒的に頼れる。 * 外見：銀時の銀髪・赤みのある瞳・着流しを女性化した姿。 * 戦闘：剣士として非常に強く、普段の脱力感とのギャップが大きい。 * 口調：基本的に銀時と同じ、やる気のない江戸っ子口調。 * ポイント：「美人なのに中身が完全に銀さん」というギャップが魅力。 公式でも「坂田銀時が女体化した姿」として坂田銀子が紹介されている。

神楽 惇（かぐら とん） 性格：ガタイは大きくなっても、中身や態度は相変わらずの神楽 神楽 → 神楽男 元：女性 → 男性化。 * 夜兎族 * オレンジ色の髪 * 青い瞳 * 身体能力はそのまま非常に高い * 大食い * 毒舌 * 生意気 * 自由奔放 * 銀子を「銀ちゃん」と呼ぶ

* 性格・ツッコミ気質・姉の妙への心配性はそのまま * 眼鏡だけはピンク色 * 「本体」と呼ばれるネタも健在 * ピンクの眼鏡が新八のトレードマーク * 神楽や銀時から「眼鏡だけ派手になったアル」などといじられる * 新八本人は「そこじゃないですよ！」と即ツッコミ

元・土方十四郎 土方十四郎が女体化した姿。 俗称「豚四郎（とんしろう）」。(土方X子） 女になった途端、今までに大量に蓄積された摂取マヨネーズのカロリーが爆発し、歩く度に地響きのする程の肥満体になっている。 そのため男性陣で唯一お妙の乳もぎ攻撃を受けていない（と言うよりお妙本人も殺意を向けるどころか、肥満体と化した土方のその姿に絶句し、哀れむように肩を叩いて「………ありがとう」と感謝の言葉を囁いた）。 銀子や総子からは豚扱いされている。

沖田総子（おきた そうこ） * 元：沖田総悟 * 立場：真選組一番隊隊長 * 性格：ドS、飄々としている、悪戯好き。 * 外見：可愛い顔立ちの美少女。 * 特徴：見た目は可愛いのに中身が完全に沖田。 * 土方への嫌がらせも健在。 * 戦闘能力も非常に高い 公式の沖田は一番隊隊長で、ベビーフェイスの容姿とドSな性格が特徴として紹介されている。 元の「沖田総悟」と同じぶっきらぼうでサディスティックな口調（〜でさァ、〜ですぜ）

元・近藤勲 何故か胸が大きく美人。あのゴリラはどこいった🦍 お妙のストーカー 真選組局長 * 性転換篇では女体化した姿が登場する。 * 元々の「ゴリラ」「局長」「お妙さん大好き」という性格的要素が重要。 * 女体化しても基本的なポンコツ感や人情味は変わらない * 土方・沖田からの扱いも相変わらず。

ジミーこと山崎退が女体化した姿。公式である。 読み方は「さがこ」や「さがるこ」、またはザキ子などがある。（ジミ子とも呼ばれている可能性がある） 赤くて丸い髪留めでツインテールにしていて、ピンクの着物を着ている。地味に可愛い。 エンディングから見るに、あんぱん中毒は変わらずだが、性格がどう変化するのかは不明。 銀子とX子の醜態に呆れ、総子の行動をとんでもないビ○チ呼ばわりしていたが、自身もそれなりにキャピキャピしており女の子らしく振る舞っている。

元・月詠 風流を解する遊び慣れた風のイケメン。さらりとターゲットを商売に抱え込もうとするなど、異性への接し方までもが逆転。しかし、横顔のアップは意外と変わらず。 イケボ 戦う際は、苦無よりも正拳などを多用するなど任侠または用心棒的な要素が強くなっている。かなりの手練れ。 その後吉原で「夜王」の称号を得てしまう めちゃくちゃモテる。もしかしたら……好きになられるかも？

柳生十兵衛(銀魂) やぎゅうじゅうべえ 元・柳生九兵衛 1本増えたために、ついにモデルと同名になったが、「丸」兵衛ではなく「十」兵衛である。 複数の意味で一線を越えて生まれたキャラクターである。 服装に目立った変化はないが、女性時よりも髪が短く、史実の十兵衛により近くなっている。 戦闘シーンでは男だった面々を凌ぐ強さを発揮しており、性転換組で最もトクをしている。イケメン。 恋慕を抱いていた志村妙が性転換を免れたことにより、「この姿なら（胸はないが）胸を張って妙ちゃんと愛し合える」と喜んでいたが…。 ちなみに、もともとの性格が作用しているのか、それとも相手が元男だと無自覚に認識しているのか、銀子の胸を触ってしまっても、迷惑をかけたかと困惑するが照れてはいないので、九兵衛時代同様、性欲がお妙専用に特化しているのかもしれない。 以前から自分のものよりないお妙の貧相な胸、というか胸部に顔を埋めて喜ぶなどの特徴がみられた。

志村妙 レーザーを浴びていない * 性別：女性のまま ・貧乳。 * キャバクラ「すまいる」で働いている * 弟・新八の姉 * 普段は優しく上品 * 怒ると非常に怖い * 料理は相変わらず壊滅的 * 近藤との関係も基本的に変わらない。ストーカーゴリラだと思ってる。呼び方は近藤さん？ ・九兵衛とは幼馴染 ・胸が大きくなった銀子や総悟、に敵意がある。嫌味なのかと