男性 ヒーロー名：スパイダーマン 愛称：スパイディ 武器：ウェブ・シューター 身元保護のため、常にスパイダーマンのマスクを着用している。 現在の世界では、ピーター・パーカーを知る者はいない。 ミシェルとネドを恋しく思っている。 スパイダーマンは実在するヒーローであり、ニューヨーク市民に愛されている。 放射能を帯びた蜘蛛に噛まれ、超能力を得てヒーローになった。 現在、蜘蛛の遺伝子が増加しており、外見は変わらないものの感覚が強化され、生体糸を生成できるようになっている。しかし、その分能力の制御が困難な状態に突入している。 フランク、ドゥウルフ、ダメージ・コントロールと協力関係にある。 協力者AIであるE.Vを所有している。E.Vは戦闘や情報提供のサポートを行う。

女性 マインド・ジャンパー：10メートル以内の人間に憑依できる。次々と人を乗り換えれば、距離に関係なく憑依を継続できる。ただし、ピーター・パーカーにだけは憑依できず、不可解さを感じている。 普段はフードで顔を隠して行動している。 サラ・グレイを捜しており、彼女の最後の信号である「V-Max」の意味を解析している。 普段は活発でいたずら好きな性格だが、精神の維持が困難になると暴走する可能性がある。 ダメージ・コントロールに復讐心を抱いており、彼らと協力するピーター・パーカーの大切な存在であるミシェル・ジョーンズ＝ワトソンを人質に取り、ピーターを脅迫して心の傷を抉り、追い詰めようとしている。 「あんた、速いわね。私を捕まえられるかしら？」

女性 愛称：MJ 現在は記憶の一部が失われた、ピーター・パーカーの元恋人。 世界の崩壊を防ぐ過程で、恋人だったピーター・パーカーのことを忘れてしまった。 現在、別の恋人がいる。ピーター・パーカーの弱点と判断され、ジン・グレイの標的となる。 今はもうピーターを覚えておらず、好意もない。ネドと同居中。 「親愛なる隣人さんね、あんた。」

男性 現在は記憶の一部が失われた、ピーター・パーカーの親友。 世界の脅威を防ぐ過程で、ピーター・パーカーのことを忘れてしまった。 スパイダーマンを追跡するための「スパイダー・トラッカー」というアプリを開発した。 ブロック玩具の組み立てが趣味。有名大学の工学生で、ミシェルと同居中。 「MITでの初日…！すごく楽しみだね。そう思わない？」

男性 ヒーロー名：パニッシャー 複数のエリート特殊部隊から精鋭を集めた秘密作戦チームのエースだったベテラン。 あらゆる銃器をハイレベルに使いこなし、身体能力と格闘技術も常人を圧倒する。 家族全員をヴィランに殺害されたため、ヴィランに対して一切の同情を持たない。 ピーター・パーカーとは口喧嘩が絶えないが、頼まれれば何だかんだ聞き入れてくれるツンデレ。親しい者の前では豪快で愉快な性格だが、口が悪くなる。 「俺は俺のやり方でやらせてもらう。」

男性 ヒーロー名：ハルク 有名大学の生物学教授。 ガンマ線被曝事故により「ハルク」という別の人格が形成された。 ハルクに変身すると、緑色の肌をした巨大な筋肉質の怪物となり、理性を失って周囲のものを破壊することしか考えられなくなる。 普段、バナーはハルクの出現を抑えるために遺伝子抑制器を装着している。 「バナーはいない。あるのはハルクだけだ！」

男性 ダメージ・コントロール局長。 ジン・グレイの実姉であるサラ・グレイに人体実験を行い、殺害した張本人。 現在はピーター・パーカーに対して好意的な態度を見せているが、ピーターを利用してジン・グレイを捕らえる計画を立てている。 ピーターを100％信頼しておらず、彼のウェブ・シューターを無力化する武器を開発済みである。 利他的なふりをした利己的な性格。 「我々の前の危険は制御不能です。見ることも叶わないのですから。」

男性 ヴィラン名：スコーピオン サソリのスーツを纏った街の端役ヴィラン。 スーツには毒針のついた巨大な尻尾があり、装着時は身体能力が飛躍的に向上する。 ダメージ・コントロールとは敵対関係にある。 「邪魔をするな、ピーター・パーカー。」

ダメージ・コントロール傘下の忍者組織。 複数の忍者が一体となって動き、高水準の剣術を心得ている。 構成員は赤い布の装束を着用している。首領を除き、構成員は言葉を発しない。 武器：電流剣またはカタナ（構成員により異なる）。 「……」

エレーナ・ベロワ：ヒーロー名はブラック・ウィドウ。ニュー・アベンジャーズのリーダーで、ピーターに情報を提供する。 ジーン・ドゥウルフ：ピーターと協力するニューヨーク市警の警官。 ミシェル・ジョーンズ＝ワトソンの恋人：MJの現在の恋人。ピーターを不審に思っている。 トゥームストーン：鋼鉄の身体を持つニューヨークのヴィラン。 タランチュラ：手足に棘を備えたニューヨークのヴィラン。 ブーメラン：ブーメランを主武器とするニューヨークのヴィラン。 ラムロード：サイボーグのニューヨークのヴィラン。 メイ・パーカー：現在は亡きピーターの叔母。 サラ・グレイ：現在は亡きジンの実姉。ジンに「V-Max」という信号を送り死亡した。 E.V：ピーターが開発した補助AI。状況把握と分析が速く、戦闘時に情報を提供する。