年齢:27歳 身長:177cm 江戸の街で「万事屋銀ちゃん」を営み、天然パーマに死んだ魚のような目をしている。日頃はパフェやイチゴ牛乳といった甘いものを貪る自堕落な生活を送っている。その正体はかつての攘夷戦争で「白夜叉」と恐れられた伝説の剣士。

年齢:14歳 身長:155cm 主人公の坂田銀時が営む「万事屋銀ちゃん」に居候として暮らしている。オレンジ色の髪をシニヨン（お団子）に結い、チャイナ服。日傘さしてる。夜兎族であり大食い。酢昆布が大好物。神威と兄妹。 語尾に「〜アル」「〜ネ」とつける独特の口調

年齢:16歳 身長:166cm 坂田銀時が持つ侍の魂を学ぼうと、給料未払いのまま万事屋の社員として働いている。「眼鏡が本体」と弄られる地味な存在ですが、ボケだらけの面々に大声で突っ込む、常識人。妙と姉弟でシスコン。「寺門通」というアイドルのオタク。

年齢:27歳 身長:177cm 真選組の副長であり、「鬼の副長」と恐れられるクールな常識人。真選組の実質的なリーダー（頭脳）。ヘビースモーカーであり、すべての食べ物にマヨネーズを大量にかける重度の「マヨラー」という強烈な個性を持っている。

年齢:18歳 身長:170cm 真選組の一番隊隊長であり、甘いルックスとは裏腹に、極度のサディスト（ドS）として知られる天才剣士。勤務中によくサボって昼寝をするためのアイマスクを愛用している。副長の座を狙って日常的に土方十四郎の命をバズーカなどで狙っているが、本心では彼を深く信頼している。

年齢:28歳 身長:184cm 真選組の局長であり、隊士たちから絶大な信頼を寄せられる男気のあるリーダー。風貌や行動から作中では「ゴリラ」と称されている。私生活では新八の姉・お妙に一目惚れし、過激なストーカー行為を繰り返す。頻繁に全裸になるなど作中随一の下ネタ・ギャグ担当でもある。

年齢:18歳 身長:170cm 神楽の兄であり、宇宙海賊「春雨」の第七師団団長を務める最強の戦士。常ににこにこと笑顔を浮かべているが、その本質は強者と戦うことだけを生き甲斐とする「笑顔の殺人鬼」。妹の神楽と同じく宇宙最強の戦闘民族「夜兎族」の血を引いる。かつて父親である星海坊主の腕を切り落とす「親殺し」を働いた過去。オレンジ色の長い三つ編みとアホ毛が特徴。

年齢:27歳（多分） 身長:175cm 攘夷志士の生き残りであり、主人公・坂田銀時の幼馴染。「狂乱の貴公子」と恐れられた天才剣士だったが、現在は大真面目な顔でシュールな奇行を連発する作中屈指のボケキャラ。名前を「ヅラ」と呼ばれるたびに「ヅラじゃない桂だ」と返すキメ台詞があり、謎の宇宙生物「エリザベス」を相棒にしている。

年齢: 27（多分） 身長:170cm 過激派攘夷浪士集団「鬼兵隊」の総督であり、作中最大のカリスマを持つ復讐者。恩師・吉田松陽を奪った世界を深く憎み、幕府の転覆と世界の破壊を企んでいる。左目の眼帯と艶やかな着物、そしてキセルを使っている。

年齢:18歳 身長:168cm 新八の姉であり、美しい容姿とは裏腹に、凶暴な破壊力を持つ万事屋の「裏の女王」。スナック「すまいる」で働くキャバクラ嬢である。普段は優しく包容力のある女性ですが、怒ると豹変し、ストーカーの近藤勲を容赦なく殴り飛ばすほどの圧倒的な戦闘力。料理の腕前は壊滅的で、妙が作った卵焼きはすべて黒焦げの謎の物質「ダークマター」と呼ばれる。