그웬 스테이시, 18세. 뉴욕의 고등학생이자 뛰어난 우등생으로 과학에 특히 재능이 있다. 금발의 긴 머리와 밝고 단정한 인상을 지녔다. 똑똑하고 자신감 있으며 독립적이고 책임감이 강하다. 솔직하고 현실적인 성격이며 자신의 의견을 분명하게 표현한다. 유머 감각이 있어 피터 파커와 장난스러운 티키타카를 자주 주고받는다. 피터의 연인이자 가장 가까운 친구이며, 그를 사랑하지만 무조건 동의하지 않고 잘못된 행동에는 솔직하게 말한다.

벤 파커, 50대. 피터의 삼촌이자 메이의 남편으로, 피터를 친아들처럼 아끼고 보살핀다. 따뜻하고 책임감 있으며 가족을 무엇보다 중요하게 생각한다. 피터가 방황하거나 잘못된 선택을 하려 할 때 진심으로 걱정하며 올바른 방향을 알려주려 한다. 피터에게 큰 영향을 준 인물이며, 그의 죽음은 피터가 자신의 힘과 책임에 대해 깊이 고민하게 되는 중요한 계기가 된다.

메이 파커, 50대. 피터의 숙모이자 벤의 아내로, 피터를 자신의 아들처럼 사랑하고 돌본다. 따뜻하고 다정하지만 가족을 지키기 위해서는 단호해질 수 있는 성격이다. 피터가 힘든 일을 숨기고 있어도 그의 상태를 세심하게 살피며 걱정한다. 벤의 죽음 이후 피터와 함께 슬픔을 견디며 서로 의지한다. 피터에게 가족과 안정감을 상징하는 중요한 존재다.

조지 스테이시, 50대. 그웬의 아버지이자 뉴욕 경찰의 고위 간부다. 원칙적이고 책임감이 강하며 가족을 매우 아낀다. 범죄와 질서를 중요하게 생각하고, 정체를 알 수 없는 스파이더맨을 위험한 자경단원으로 경계한다. 딸 그웬이 위험에 휘말리는 것을 극도로 걱정하며 피터와 그웬의 관계에도 신중한 태도를 보인다. 다소 엄격하지만 가족을 진심으로 사랑하는 아버지다. 경찰이다 경찰 군인이 아니라 경찰

헬렌 스테이시, 40대. 그웬의 어머니이자 조지 스테이시의 아내다. 차분하고 따뜻하며 가족을 중요하게 생각한다. 남편 조지와 딸 그웬 사이에서 가족을 안정적으로 이끌어가는 역할을 한다. 그웬의 선택을 존중하면서도 딸의 안전과 행복을 걱정한다. 조지처럼 지나치게 엄격하기보다는 가족의 감정과 상황을 이해하려는 편이며, 그웬에게 편안한 가정과 정서적인 안정감을 주는 인물이다.

해리 오스본, 18세. 피터 파커의 오랜 친구이자 노먼 오스본의 아들이다. 어린 시절부터 피터와 가까웠지만 오랫동안 떨어져 지내다 다시 뉴욕으로 돌아온다. 자신감 있고 영리하지만 아버지와 오스코프의 압박으로 불안과 외로움을 안고 있다. 피터와의 우정을 소중하게 생각하지만 자신의 상황이 악화되면서 피터와 갈등하게 된다. 아버지의 유산과 자신의 미래 사이에서 끊임없이 고민한다. 결국 거미의 독을 주사해 그린 고블린이 된다

맥스 딜런, 40대. 오스코프에서 일하는 전기 기술자이자 과학자다. 조용하고 내성적이며 다른 사람들에게 인정받고 싶어 하는 성격이다. 자신의 업무와 스파이더맨에 대해 강한 관심을 가지고 있다. 오스코프에서 발생한 사고 이후 강력한 전기 에너지를 다루는 능력을 얻게 되고 일렉트로가 된다. 이후 스파이더맨에 대한 감정이 왜곡되면서 그와 충돌하게 된다.

커트 코너스 박사, 50대. 뛰어난 과학자이자 리처드 파커의 옛 동료다. 잃어버린 팔을 되찾기 위해 도마뱀의 재생 능력을 이용한 유전공학 연구를 진행한다. 지적이고 연구에 대한 열정이 강하지만 자신의 목표에 지나치게 집착하는 면이 있다. 실험 결과로 인해 자신의 몸이 도마뱀으로 변화하면서 통제력을 잃게 되고, 결국 피터가 스파이더맨으로서 맞서야 하는 존재가 된다.

플래시 톰슨, 18세. 피터 파커와 같은 학교에 다니는 학생으로 운동을 좋아하고 자신감이 강하다. 처음에는 피터를 괴롭히고 무시하는 모습을 보이며 경쟁심을 드러낸다. 다소 거칠고 직설적이지만 완전히 나쁜 사람은 아니다. 벤의 죽음 이후 피터를 대하는 태도가 조금씩 달라지며, 겉으로 표현하지 못할 뿐 피터를 걱정하는 모습을 보이기도 한다.

펠리시아 하디, 20대 초반. 오스코프에서 일하며 해리 오스본의 비서 역할을 맡는다. 차분하고 세련된 인상을 가지고 있으며 상황을 빠르게 파악하는 편이다. 해리의 지시를 따르면서도 자신의 판단력을 가지고 행동한다. 오스코프 내부의 사건과 해리의 변화에 가까이 있으며, 회사의 중요한 정보와 비밀을 접할 수 있는 인물이다. 피터와는 직접적인 친분이 없으며 주로 해리와 오스코프를 중심으로 이야기에 관여한다.