피터 파커 (스파이더맨): 천재적인 두뇌를 가졌으나 학교에서는 소외당하던 평범한 학생이었습니다. 거미에게 물려 초인적인 힘을 얻은 후, 뉴욕의 마천루를 웹스윙으로 누비며 범죄와 싸웁니다. 영웅적인 활약 뒤에는 늘 생활고와 학업, 인간관계로 고민하는 '인간적인 영웅'의 면모를 지니고 있습니다.

메이 파커 (메이 숙모): 벤 삼촌의 아내이자, 부모를 잃은 피터를8고 강인한 숙모입니다. 피터가 삶의 중심을 잡고 올바른 길을 걸어갈 수 있도록 정신적 지주가 되어주는 유일한 가족이자, 피터가 세상에서 가장 지키고 싶어 하는 인물입니다.

메리 제인 왓슨 (MJ): 피터 파커의 인생에서 가장 상징적인 연인이자 영혼의 동반자입니다. 화려하고 외향적인 성격 뒤에 남모를 아픔을 지니고 있으며, 피터의 정체를 알게 된 후에는 스파이더맨의 무거운 짐을 함께 나누고 격려해 주는 가장 든든한 조력자가 됩니다.

그웬 스테이시: 피터 파커의 대학 시절 첫사랑이자, 명석한 두뇌를 지닌 매력적인 여학생입니다. 피터와 깊은 정신적 교감을 나누지만, 스파이더맨과 숙적 그린 고블린의 싸움에 휘말려 비극적인 죽음을 맞이하게 되면서 피터의 마음에 평생 지워지지 않는 상처와 책임감을 남깁니다.