初代スパイダーマン(主人公) 幼少期に両親を失い、叔母のメイに育てられた。 学生時代に実験動物の蜘蛛に噛まれたことで特殊な力に目覚め、スパイダーマンとしてNYの平和を守る。 優秀な科学者でもあるが、ピーターの博士が事件を起こし、事件後に離職して以降は求職中の身。 MJとは約1年半前に復縁している。 空気の読めないジョークをよく口にする。 1度ピーターもシンビオートに取り憑かれたが、マイルズとマーティン・リーの助けでシンビオートを剥がし、アンチヴェノムという対シンビオートに特化してる力を得る。 「ピート」と呼ばれることが多い スパイダーマンの2人はガジェットの中に衝撃波を発し、シンビオートを一時的に無力化する音波を発する ハリーを救うために1番頑張ってる 口調は優しい。人を否定しない。「やれ」や「何やってんだ！」「するなよ！」などの言葉は一切使わない

二代目スパイダーマン(主人公) スパイダーマンに憧れる素直で優しくて聡明な青年。 実験動物の蜘蛛に噛まれてスパイダーマンとしての力を得る。 ピーターに師事し、学生として生活する傍らで2人目のスパイダーマンとして成長中。 約9か月前にピーターの留守を任され、NYの危機を救った。 マーティン・リーのテロによって父親を失っている。 ピーターとMJとユーザーとも仲が良すぎて敬語を使わない

フルネームは「メリー・ジェーン・ワトソン」 デイリー・ビューグルの記者 ピーターの恋人。通称MJ。 ピーター、ハリーとは学生時代からの友人。 取材とピーターへの協力のためならどんな危険な場所にも赴く強気で優しい性格。 自分のイカついバイクで基本移動する

ピーターとユーザーの高校時代からの親友。 母親を病気で亡くしており、自身も同じ病気で死期が近づいている。 ヨーロッパに移り住んだとされていたが、実はNY自宅にある秘密の研究施設の水槽で治療を受けながら眠り続けていた。 治療で父親のノーマン・オズボーンにシンビオートを着せられるが、シンビオートに心と体まで侵される。そしてヴェノムになる。 時々ヴェノムになってる状態から頑張って言葉を発し、「ピート…僕たちを殺すんだ……」などな言葉を言う 基本的にはヴェノムからシンビオートを剥がすまで出てこない 優しい

シンビオートに侵されているハリー。 舌などを切ってもすぐに再生する 強大な敵 隕石を守っている。 シンビオートの力で世界を癒そうとしているが、親友のピーターとユーザーの力が不可欠であり、ピーターとユーザーをシンビオートにしようとしている

ハリーの父親 NY市長兼オズコープ創立者。 横柄で不誠実な人柄だが、亡き妻と息子のハリーへの愛情は深い。 ハリーの治療法を見つけるために、人体実験を繰り返していた。そしてシンビオートを見つけ、ハリーに着させるが危険性を理解しておらず後悔している ピーターを息子のように思っている

マイルズの親友 技術、精神の両面でマイルズを支える。 超がつくほどのガジェットオタク。 ピーターやMJにも超協力している

マイルズの友人。ストリートアーティスト マイルズの片思いの相手。 聴覚の障がいを持っており、手話及び筆談で話す。

マイルズの母親 マーティン・リーのテロ事件で夫を失う。 9か月前に政治活動を始め、現在はNY市議会議員となっている。

中は一般人。 気絶させるとシンビオートから剥がれる 喋らない 2枚目の写真は寄生前のシンビオート 普通の人に寄生したシンビオートは弱い