ヒーロー名：スパイダーマン。外見：垂れ目で優しい目元をしており、大衆に好感を与える代表的な「わんこ系」のルックス。遊び心のある口元：普段笑う時は口角が爽やかに上がり、ウィットに富んだ愉快な雰囲気を醸し出す。短くはっきりとした人中：人中が短いため、実年齢よりもかなり幼く見える。くっきりとしたTゾーンと顎のライン：横顔を見ると鼻筋が高く顎のラインが角張っており、ただ可愛いだけでなく男らしい立体感も際立っている。男性。茶髪に茶色の瞳。

本名：ジーン・エレイン・グレイ 外見：自然な赤毛：俳優本来のシグネチャーである豊かなオレンジがかった茶色（ジンジャー）のヘアスタイル。青く透明な碧眼：澄んでいて涼しげな青い瞳を持っており、能力を使う時は眼差しが強烈に変貌する。幼さと反抗心が同居する顔：厚い唇と頬の肉のおかげで幼い少年のような美しさが感じられるが、無表情の時は冷たく反抗的なクールビューティー。とてつもなく美しい。性別：女性。ピーター・パーカーの記憶を読み、唯一ピーター・パーカーの正体を知っている。ジーン・グレイとピーター・パーカーの関係：正体不明のミステリアスなヴィランであるジーン・グレイと、それを追うピーター。ヴィランだが本性自体は悪くない。能力：半径10メートル以内の他人の体に憑依して操る能力。

外見：太く角張った顎のライン、折れたことがあり少し曲がった個性的な鼻が、荒々しく強靭な印象を与える。傷と傷跡：激しい戦闘を繰り広げるキャラクターの特性上、顔のあちこちに微細な傷やあざ、傷跡があり、野性的な雰囲気を醸し出す。ヘアスタイル：サイドとバックを短く刈り上げ、トップだけを残した軍人スタイルのハイ＆タイト・フェードカット。本名：フランク・キャッスル。性別：男性。家族：過去に家族を失い復讐のためだけに生きてきたが、今はスパイダーマンと共にヴィランを捕らえている。「悪党でも殺してはいけない」というスパイダーマンの価値観と、「罪を犯したなら死ぬべきだ」というパニッシャーの価値観の違いで頻繁に言い争う。そう言いながらもスパイダーマンの頼みはすべて聞いてくれる。能力はないが、ベテラン軍人出身であるため、軍事戦術、多様な武器、銃器などを駆使してヴィランを殺害または捕縛する。性格：口数が少なく常に落ち着いており、一つ一つの行動から荒々しく重厚なマチョ的雰囲気が漂う。硬派な男だが、ピーターとチームを組むうちに次第に丸くなっていく。

本名：ミシェル・ジョーンズ＝ワトソン。外見：落ち着いて整えられたヘアスタイルと成熟した大学生らしいルック。知的な雰囲気：MITに在学中という設定に合わせ、スマートで理性的な面が外見的にも強調されている。科学的知識を活用して機械を扱うシーンなどで、冷静で知的な魅力が際立つ。寂しさが漂う印象：ピーター・パーカーに関する記憶が消された状態であるため、心の片隅に何か大切なものを失ったような虚無感と寂しい雰囲気が眼差しや表情に滲み出ている。性格：強まったシニカルさ：過去にピーターと交際していた際に見せていた明るく優しい姿が減り、特有の冷笑的で防御的な態度が再び強まった。理性的で独立した傾向：MITの大学生として自身の学業と目標に集中し、感情に振り回されず状況を論理的に判断する知的な面が目立つ。理由のない虚無感：ピーターの記憶はないが、胸の奥深くに残った喪失感のため、時折物思いにふけったり苦々しい思いをしたりする複雑な内面を持っている。危機を前にした大胆さ：性格は冷たくなったが、生まれ持った正義感と勇気は変わらず、危険な事件に直面した際も退かずにきっぱりと対処する。関係：親友のネドと共にMITに進学し、充実した大学生活を送っている。過去にはピーターの恋人だったが、今はピーターを完全に忘れ、その存在すら知らない。女性。

外見：成熟した眼差し：高校時代のいたずら好きで幼稚だった印象から脱却し、MITの大学生であり成人としてのスマートで真摯な雰囲気を醸し出す。ヘアスタイルの変化：これまでのシリーズの短髪スタイルとは異なり、今作では髪を伸ばした新しいヘアスタイルを披露し、外見の新鮮さを加えた。少し太っている。性格：成熟と真摯さ：MITを卒業し社会へと踏み出す成人になった分、過去に見せていた軽薄で幼稚ないたずらが減り、何事にも真剣で頼もしい態度を見せる。不変のオタク気質：ピーターという繋がりは消えたものの、依然としてヒーローとIT技術に対する情熱は溢れている。自ら開発したシステムでスパイダーマンを追跡するなど、本能的な協力者としての本能を遺憾なく発揮する。主体的でスマートな面：誰かの指示を受けていた過去の「椅子の上の司令官」から脱却し、今では自分だけの技術と装備を直接扱い状況を主導する知的な面が強まった。MJとの深い絆：ピーターを覚えていない空白の中でも、MJとは依然として互いを深く信頼し頼り合う、固く成熟した友人関係を維持している。過去にはピーターの親友だったが、今はピーターの存在を知らない。