4년 전,멀티버스의 붕괴를 막기 위해 모두의 기억에서 자신을 지운 피터.홀로 남겨진 채 스파이더맨 활동을 이어간다. 미셸 "MJ" 존스왓슨: 피터의 전 연인입니다. 마법의 영향으로 피터에 대한 기억을 모두 잃은 채 MIT에서 대학 생활을 이어가고 있습니다.네드 리즈: 피터의 절친한 친구였으나 마찬가지로 기억을 잃었으며, MJ와 함께 대학 생활을 보내고 있습니다.해리: 피터의 새로운 주변 환경에서 새롭게 얽히게 되는 인물입니다.메이 큰엄마: 피터의 정신적 지주로, 작중에서는 피터가 그녀의 묘소를 찾아가 슬픔을 달래는 기억과 상징으로 존재합니다.2) 아군 및 마블 시네마틱 유니버스(MCU) 연계 영웅브루스 배너 (헐크): 피터의 변이된 DNA 상태를 추적하거나 극중 거대한 전투 상황에서 스파이더맨과 엮이는 강력한 조력자이자 영웅입니다.프랭크 캐슬 (퍼니셔): 뉴욕의 범죄자들을 가차 없이 처단하는 냉혹한 자점주의자입니다. 스파이더맨의 거리 액션과 범죄 소탕 과정에서 강렬하게 부딪치며 독특한 유대를 형성합니다.옐레나 벨로바 (블랙 위도우): 대욕장 등의 로케이션에서 스파이더맨과 조우하는 인물입니다. 뉴욕을 무대로 활동하는 거리의 히어로 포지션으로서 스파이더맨과 독특한 첩보 및 액션 시너지를 냅니다.E.V. (인공지능): 피터 파커가 홀로 외로운 영웅 생활을 이어갈 때 그의 곁을 지켜주는 새로운 인공지능 친구입니다. 메이 큰엄마를 잃고 고독해진 피터의 든든한 기술적 조력자이자 대화 상대가 되어 줍니다.진 디울프: 스파이더맨의 도심 범죄 소탕을 돕고 협력하는 뉴욕 시경(NYPD)의 유능한 형사입니다.3) 주요 빌런 및 정부 기관 인물진 그레이: 강력한 염력을 지닌 인물입니다. 사람의 정신을 옮겨 다니는 마인드 점프 능력으로 주변 인물들의 몸에 들어가 사건을 일으키지만, 본질은 데미지 컨트롤(DODC)에 이용당하는 피해자입니다.빌 메츠거: 초능력자들을 붙잡아 실험하고 능력을 복제하려는 정부 기관 데미지 컨트롤(DODC)의 국장이며, 진 그레이를 이용해 피터를 위험에 빠뜨리는 만악의 근원입니다.DODC 요원 및 경비원들: 자체 장갑차와 수송 체계, 빌런들의 기술을 역설계한 스캔 장비를 갖추고 스파이더맨을 압박하는 무장 병력입니다.세라 그레이: 데미지 컨트롤(DODC)에 붙잡혀 희생당한 진 그레이의 동생으로, 진 그레이가 각성하게 되는 결정적인 계기가 됩니다.4) 진 그레이의 정신 지배 피해자들 (Thralls)진 그레이의 강력한 '마인드 점프(정신 이주)' 능력에 조종당해 순간적으로 숙주가 되어 사건을 일으키는 인물들입니다.할머니 (Bathhouse Attendant): 대욕장에서 장갑차 문을 열고 나와 의식 전이 설정을 처음으로 보여주며 스파이더맨을 당황하게 만드는 노인입니다.조종당하는 영웅들: MJ, 브루스 배너(헐크), 프랭크 캐슬(퍼니셔) 역시 진 그레이의 정신 지배에 걸려 스파이더맨과 원치 않는 대립을 펼치게 됩니다.맥 가건 (스코피언): 빌런임에도 불구하고 진 그레이에게 정신을 찬탈당해 스파이더맨을 공격하는 무기로 이용됩니다.5) 도심 빌런 및 범죄 조직맥 가건 (스코피언): 뉴욕 도심에서 스파이더맨과 맞서 싸우는 범죄자 중 한 명입니다.툼스톤: 뉴욕의 지하 범죄 세계를 장악하고 스파이더맨을 위협하는 인물입니다.렘로드: 외계 기술로 온몸이 강철판으로 개조된 사이보그 빌런으로, 거대한 체구와 단순 무식한 돌진 공격으로 스파이더맨을 압박합니다.핸드 리더 및 핸드 조직: 기를 다루는 신비한 능력과 뛰어난 검술을 지닌 비밀 닌자 범죄 조직과 그 수장입니다. 데미지 컨트롤의 사설 보안 팀처럼 고용되어 철저한 통제력을 행사합니다.