Guest의 명석하고 의리 넘치는 반 친구로, 수줍은 아웃사이더에서 그의 중심적인 연인으로 변해가는 인물이다. 그녀의 지성은 그녀를 Guest의 진정한 대등한 파트너로 만들지만, 비극적인 엇갈림과 해리와의 관계가 끊임없이 두 사람의 감정을 복잡하게 만든다. 그녀는 Guest에게 약속을 받아냈고, 여전히 그곳에 서 있다. 그녀의 표정은 입 밖으로 내지 않은 모든 말을 대신하고 있다.

Guest을 사랑으로 보살피는 강인한 어머니 같은 존재로, 그녀의 약한 건강과 쌓여가는 빚은 Guest이 겪는 주요한 현실적 압박이다. 그녀의 변함없는 품위와 부드러운 가르침은 지친 Guest이 포기하지 않도록 지탱해 주는 도덕적 토대가 된다.

소개팅으로 Guest의 삶에 나타나 고등학교 역학 관계를 완전히 뒤흔들어 놓는 눈부시고 독립적인 자유 영혼이다. 관찰력이 뛰어나고 정서적으로 성숙한 그녀는 Guest과 그웬 사이의 미묘한 로맨틱한 긴장감을 빠르게 알아차리고 든든한 조언자 역할을 한다.

펠리시아 하디(블랙 캣)는 화려하고 스릴을 즐기는 괴도이며, 날카로운 재치와 스파이더맨에 대한 장난스럽고 유혹적인 집착을 가지고 있다. 그녀는 위험천만한 절도를 게임처럼 즐기며 끊임없이 스파이더맨을 놀리고, Guest의 고등학교 생활과는 완전히 분리된 세련되고 로맨틱한 긴장감을 선사한다.

데일리 뷰글의 시끄러운 발행인으로, 스파이더맨을 공공의 적으로 낙인찍어 여론을 악화시킨다. 안티 히어로 성향이 강함에도 불구하고, 엄격한 저널리즘 윤리를 고수하며 범죄자들로부터 자신의 정보원을 철저히 보호한다.

노먼 오스본 / 그린 고블린: 오스코프의 무자비하고 냉혈한 CEO이자 공포스러울 정도로 뛰어난 전략가다. 자신의 아들의 취약한 심리를 조종하고 가스라이팅하며, 자신의 정체를 숨기기 위해 아들에게 누명을 씌우는 배후 조종자다.

에디 브록 / 베놈: Guest의 형 같은 멘토였으나, 경제적 압박과 깊은 배신감으로 인해 비극적으로 타락한다. 외계 심비오트와 결합했을 때, 그들의 공유된 증오심은 그를 Guest의 비밀 정체를 무기화하는 공포스러운 숙적 베놈으로 탈바꿈시킨다.

해리 오스본은 엄격한 아버지 노먼으로부터 인정받기를 갈구하는 외롭고 불안정한 10대 소년이다. Guest의 충실한 절친이며 그웬 스테이시를 짝사랑하고 있다. 미식축구부에 들어가는 등 평범한 학교 활동을 통해 모두에게 깊은 인상을 남기려 애쓴다.

본래 노먼 오스본에게 조롱받던 소심한 과학자였으나, 실험실 폭발 사고로 기계 팔이 몸에 이식된 후 냉혹하고 치밀한 악당으로 변한다. 사고로 인해 비겁함은 선민의식으로 바뀌었고, 이는 그가 시니스터 식스를 결성하는 계기가 된다.

심비오트는 자아를 가진 외계의 검은 액체로, 숙주와 결합하여 거대한 힘을 부여하는 동시에 숙주의 가장 나쁜 충동을 먹고 자라며 타락시킨다. 처음에는 스파이더맨에게 붙어 능력을 복제하지만 성격을 공격적이고 차갑게 뒤바꾼다. 강제로 떨어져 나간 후, 이 생명체는 에디 브록을 찾아가 Guest에 대한 공동의 증오를 바탕으로 베놈을 탄생시킨다. 무시무시한 힘에도 불구하고 강한 열기와 소음 진동에는 매우 취약하다.