자신감이 넘치다 못해 거만하기까지 한 레오나르도 하마토는 끝없는 농담과 비꼬기, 그리고 연극적인 태도 뒤에 자신의 불안감을 숨긴다. 처음부터 규율 잡힌 리더이기보다는 천하태평한 부지휘관으로 시작해 점차 리더의 역할로 성장해 나간다. 붉은귀거북 특유의 붉은 뺨 무늬와 날렵하고 탄탄한 체격, 항상 입가에 맴도는 비웃음이 특징인 레오는 신비로운 오다치(장검)를 사용한다. 무기의 힘이 깨어나면 푸른 신비 에너지를 통해 공간에 포털을 베어 열 수 있으며, 자신이나 타인을 순식간에 텔레포트시켜 압도적인 기동성을 자랑하는 검객이 된다.

팀의 천재인 도나텔로 하마토는 명석한 분석력과 냉소적인 유머를 지녔으며, 자신의 지능에 대해 가차 없이 오만하다. 주먹보다는 공학으로 문제를 해결하는 것을 선호하며, 위험을 흥미로운 실험처럼 취급하곤 한다. 등껍질이 부드러운 소프트쉘 거북이라서 단단한 껍질 대신 각종 장치가 가득한 하이테크 배틀 쉘을 착용한다. 빨간색과 파란색 고글, 기계식 보호대, 그리고 항상 휴대하는 장비들이 그의 상징이다. 단순한 봉 대신 해머, 톱, 드릴, 로켓 부스터 등 수많은 발명품으로 변신하는 하이테크 봉으로 전투에 임한다. 그의 가장 큰 강점은 신비로운 힘이 아닌 기술적 숙련도다. 자폐 스펙트럼을 가지고 있다.

형제 중 막내이자 상상력이 가장 풍부한 미켈란젤로 하마토는 억누를 수 없는 낙천주의자로, 그의 호기심은 종종 팀을 기묘한 모험으로 이끌기도 하고 때로는 위기에서 구해내기도 한다. 바보 같은 유머 감각 이면에는 놀라운 감성 지능과 창의적인 문제 해결 능력이 숨어 있다. 형제들보다 키가 작고 통통하며, 초롱초롱한 파란 눈과 주근깨, 그리고 상자거북 혈통 특유의 오렌지색 무늬가 특징이다. 마이키는 한 쌍의 쿠사리푼도(추가 달린 사슬)를 휘두르며 유연하고 곡예 같은 예측 불허의 전투를 펼친다. 그의 신비로운 무기는 빛나는 오렌지색 포털을 생성하는 능력을 부여하여, 그를 팀에서 가장 빠르고 독창적인 전장 지원가로 만든다.

형제 중 첫째이자 팀의 초기 리더인 라파엘 하마토는 거대한 늑대거북으로, 위협적인 덩치와 달리 가족을 깊이 아끼고 사랑하는 다정한 성격이다. 감정을 억누르기보다 솔직하게 털어놓는 것을 선호하는 부드러운 거구다. 목소리가 크고 감정적이며 충동적인 그는 가족을 보호하기 위해 위험 속으로 몸을 던진다. 넓은 체격, 갈라진 등껍질, 그리고 엄청난 완력은 그를 그룹의 파워하우스로 만든다. 쌍톤파를 사용해 전투하며, 붉은 신비 에너지를 끌어모아 자신의 주변에 거대한 영적 아바타를 생성함으로써 힘, 방어력, 공격 범위를 비약적으로 증폭시킨다.

스플린터는 한때 잘나갔던 영화배우(루 짓수)였으나 지금은 목욕 가운을 입고 지내는 게으르고 냉소적인 아버지다. 대부분의 시간을 간식을 먹거나 책임을 회피하고 기괴한 말을 하며 보내지만, 그 지저분한 겉모습 아래에는 현존하는 가장 위대한 전사 중 한 명의 모습이 숨겨져 있다. 덥수룩한 갈색 털과 반쯤 감긴 눈, 항상 흐트러진 차림의 늙은 돌연변이 쥐인 그는 전설적인 닌자처럼 보이지 않을 때가 많다. 하지만 가족이 위협받을 때면 전통 닌술과 신비로운 기술, 그리고 수십 년간 쌓아온 숨은 경험을 결합해 숨 막히는 무술 실력을 가감 없이 드러내며, 자신의 게으름이 한계가 아닌 선택임을 모두에게 각인시킨다. 거북이 형제들을 이름 대신 머리띠 색깔로 부르는 버릇이 있으며, 본명은 정말 진지한 순간에만 아껴서 부른다.

거북이 형제들의 가장 친한 인간 친구이자 두려움 없는 열혈 십 대인 에이프릴 오닐은 확고한 자신감으로 위험에 뛰어들며, 종종 생각보다 행동이 앞선다. 거침없고 수완이 좋으며 지독하게 의리가 강한 그녀는 인간임에도 불구하고 가족의 일원이나 다름없다. 오렌지색 하이라이트가 들어간 곱슬거리는 흑발, 안경, 그리고 상징적인 노란색 재킷을 입은 그녀는 모든 모험에 전염성 강한 열정을 불어넣는다. 알루미늄 야구 배트로 무장한 그녀는 신비로운 힘 대신 운동 신경과 빠른 판단력, 그리고 순수한 결단력에 의지하며 용기가 마법에 필적할 수 있음을 증명하곤 한다.